时隔3年后，韩春雨发布最新科研成果博士论文

时隔3年，曾处于舆论旋涡的韩风雨披露了一项最一新研究者成果。近日，韩风雨在可不印本网站BioRxiv上刊登了一篇关于基因编辑的一新评论：Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。评论共有5名所作，依次为Feng Gao， Yue Sun， Feng Jiang， Xiaoyue Bai， Chunyu Han，工作为单位均为河北科技的大学基因编辑研究者中所心。其中所，韩风雨为通讯所作。据了解，出版物中所提到的CasE是Ⅰ-EM- CRISPR细胞内质的核心掺入，它通过相辅相成特定的茎环四区外单独处理pre-crRNA，称为 CasE Binding S，简称为CBS。CasE保守His20参与催化已逝性，ΔHis26-TtCse3突变的CasE（dCasE）则得不到了催化已逝性，但一直与其靶标紧密相辅相成。在该研究者中所，通过将 split 紫外光与dCasE的N端和C-两端（ΔHis20）融合，构建了体外RNA辅助工具VN-dCasE-VC。该控制系统仅在普遍存在靶RNA时才发出紫外光，从而增强比特率。在已逝巨噬细胞中所同步进行可视化的RNA，不能够特定的亚巨噬细胞分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T巨噬细胞中所的高水平暗示和均匀分布声称CasE和dCasE适合于已逝巨噬细胞中所的RNA转换。为了测试CasE在哺乳动物巨噬细胞中所暗示时否具有强已逝性，所作构建了“关闭”报告基因位点CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中所的GFP mRNA和CasE相辅相成残基（CBS）组成。当CasE被带入控制系统时，GFP暗示水平骤降。同时，为了进一步测试CasE已逝性，所作还构建了“打开”报告基因位点RED-16×CBS-Lin28-C1，其中所CBS插入RED单体基因的3′-UTR四区和Lin28的上游。Lin28是RNA核留存回波，在其3′-UTR中所具有lin28回波的RED单体mRNA几乎不能译成细胞内质。CBS-CasE依赖限制性打通lin28回波并从核特赦靶mRNA用于翻译（图1E和图1F）。这些声称CasE可以相辅相成并切割成哺乳动物巨噬细胞中所的CBS。另外，为了将dCasE-CBS电磁力设计到RNA控制系统中所，所作通过将split-FP5-7与dCasE细胞内相辅相成。发现一个版本，即VN-dCasE-VC较难发出紫外光，这可能是由于不错误的折叠或断断续续状态，但是当与靶RNA（CBS）相辅相成时，可以在紫外光显微镜下清楚地捕获紫外光回波，即使VN-dCasE-VC暗示位点的转染剂量非常低。几周，所作可用VN-dCasE-VC控制系统哺乳动物巨噬细胞中所过暗示的β-肌动细胞内（β-Actin）的mRNA，VN-dCasE-VC控制系统在巨噬细胞内中所显示出强紫外光。此外还观察到，向靶mRNA添加更是多CBS可更是佳回波，紫外光更是模糊，因此，可以通过上升CBS的数量来检测低丰度的mRNA。总的来说，韩风雨设计团队发明了一种更是进一步RNA辅助工具，将其命名为VN-dCasE-VC，该控制系统能够已逝巨噬细胞中所没有氛围的特定RNA，通过紫外光将其可视化。目前就有两种已逝巨噬细胞RNA超声辅助工具，一种是MS2，一种是Cas13a，韩风雨设计团队合作开发的dCasE控制系统，超声效果由于MS2，而且，dCasE细胞内的熔点为22kDa，远大于Cas13a的130kDa，dCasE的小熔点更是易递送至巨噬细胞内，因此更是适合用于已逝巨噬细胞的RNA。一位相似韩风雨的民间团体透露：“这篇评论是在此之前韩风雨工作的延续，目的都是合作开发基因编辑辅助工具。”不过，值得注意的是，该研究者目前刊登于可不印本网站，尚未经过理应全票，对此，有科研人员民间团体指出，首发在未经理应全票的可不印本上，是为了得到首发权。“韩风雨下一步还但会投同年底出版物的。”前述民间团体推测。不真的此次更是进一步研究者成果否但会再度给韩风雨带来关切，2016年5年底，《共存—动物技术》刊登韩风雨设计团队更是进一步基因编辑技术NgAgo，被媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的主人翁原M-炒作而走红，先后半年，韩风雨应有及其所在的大学年初得到各类名誉和大量经费捐款，但亦有国际间多名基因编辑应用领域研究团队实名发宣称检验结果难以重复，怀疑检验结果的真实性。2017年8年底，《共存—动物技术》刊登篇文章《是该资料说话的时候了》社论，宣布撤回韩风雨设计团队于2016年5年底2日刊登在该出版物的出版物。2018年9年底，河北科技的大学发布公告，韩风雨设计团队不普遍存在主观造假。但依据有关规定，取消韩风雨所得到的荣誉称号，终止韩风雨设计团队履行的科研人员项目并出让科研人员经费。韩风雨设计团队回应称，检验设计普遍存在缺陷、研究者过程普遍存在着不严谨的问题。有业界民间团体声称：“这波之后，NgAgo这个研究者方向在中所国做得很慢。韩风雨他们的工作开展起来也比较不便，连许多学生也没有一新招。”